Гептафтормасляная кислота (HFBA), HPLC Grade

Гептафтормасляная кислота (HFBA) марки HPLC Grade представляет собой ион-парный реагент, специально разработанный для разделения пептидов и белков методом обращённо-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. Реактив востребован в протеомике, пептидном анализе, препаративной хроматографии и при идентификации посттрансляционных модификаций белков. HFBA относится к классу перфторированных кислот и является наиболее гидрофобным представителем этой группы. По сравнению с трифторуксусной кислотой (TFA) и пентафторпропионовой кислотой (PFPA), HFBA обеспечивает значительно более сильное ион-парное взаимодействие с положительно заряженными аминокислотными остатками (лизин, аргинин, гистидин). Образующийся нейтральный комплекс повышает аффинность пептидов к гидрофобной стационарной фазе, что приводит к увеличению времени удерживания и улучшению формы хроматографических пиков. Ключевое преимущество HFBA — способность разделять пептиды, которые на стандартных фазах с TFA не удерживаются или элюируются совместно. Исследования демонстрируют, что HFBA превосходно разделяет гликированные и негликированные пептиды, достигая базового разрешения для некоторых последовательностей там, где TFA даёт лишь частичное разделение. Кроме того, HFBA эффективно разделяет пептидные смеси по количеству заряженных групп, что позволяет отделять пептиды с зарядом +1 от пептидов с зарядом +3 или +5. Продукт отличается высокой чистотой — типичная чистота составляет 99,7 процента по данным газовой хроматографии, содержание воды не превышает 0,1 процента. Реактив тестируется на содержание сульфатов и измеряется УФ-поглощение на длинах волн 230, 254 и 280 нанометров. Упаковка осуществляется в янтарные стеклянные ампулы под азотом, что предотвращает окисление и загрязнение. Одна ампула объёмом 1 миллилитр позволяет приготовить 1 литр 0,1-процентного раствора HFBA для использования в качестве подвижной фазы. Реактив применяется также в качестве реагента для секвенирования пептидов и белков по методу Эдмана, в твердофазном пептидном синтезе и для солюбилизации пептидов и белков.